Producción de antígenos y anticuerpos para la investigación de <i>Corynebacterium kutscheri</i> y <i>Bordetella bronchiseptica</i> en animales de laboratorio mediante la técnica de microaglutinación directa en placa

Abstract

Una de las técnicas que se utilizan para la detección de infecciones en animales de experimentación es la microaglutinación directa en placa. El objeto de este trabajo fue producir antígenos y anticuerpos para el diagnóstico de Corynebacterium kutscheri y Bordetella bronchiseptica, las cuales deben estar ausentes en ratas y ratones de laboratorio. Las cepas bacterianas de Corynebacterium kutscheri SL5 y Bordetella bronchiseptica, (NIH Japón) se cultivaron en medios bacteriológicos específicos. Se obtuvo una dilución de 1,5x10 UFC/ml (turbidez aproximada al tubo número 5 de la escala de Mac Farland) para C. kutscheri y una dilución de 2,1x10 UFC/ml (turbidez aproximada al tubo número 7) para B. bronchiseptica. Los antígenos producidos a partir del cultivo bacteriano se inocularon en conejos mediante un programa de inmunización para la producción de antisueros. Los títulos obtenidos mediante la técnica de microaglutinación directa en placa fueron de 1/2560 para C. kutscheri y 1/5120 para B. bronchiseptica. Los antígenos y anticuerpos obtenidos demostraron ser eficientes para el desarrollo de la técnica de microaglutinación directa en placa.

Microagglutination assay is one of the serological techniques used to detect bacterial infections in laboratory animal colonies. The objective of this research work is to produce antigens and antibodies for the diagnosis of Corynebacterium kutscheri and Bordetella bronchiseptica. These bacteria should be absent in rat and mice colonies. Corynebacterium kutscheri SL 5 and Bordetella bronchiseptica Japan NIH strain were cultured in specific bacteriological mediums. A dilution of 1,5x10 CFU/ml (tube nº 5 Mac Farland scale) for C. kutscheri and of 2,1x10 UFC/ml (tube nº 7) for B. bronchiseptica were obtained. The antigens produced from the bacteriological cultures were inoculated into rabbits following an immunization schedule in order to produce antiserums. A title of 1/ 2560 for C. kutscheri and of 1/5120 for B. bronchiseptica were obtained by using the microagglutination test. Antigens and antibodies demonstrated to be efficient to perform the direct microagglutination test.