Expresión del punto de control inmunológico HLA-G en el contexto de hipoxia en una línea celular de coriocarcinoma humano

Abstract

El HLA-G es una molécula MHC tipo I no clásica que modula negativamente la respuesta inmune local. Esta proteína tiene una expresión restringida a unos pocos tejidos en condiciones fisiológicas, mientras que puede aparecer en ciertas condiciones patológicas, como es el caso de algunos tipos de cancer. El rápido crecimiento de las células tumorales (CT) crea un ambiente hipóxico donde los bajos niveles de oxígeno conducen a la acumulación de factores inducibles por hipoxia (HIF), que modulan varias vías prooncogénicas. En este contexto, HIF podría modular positivamente la expresión de HLA-G en las CT como mecanismo de evasión del sistema inmune. Proponemos evaluar el efecto de la hipoxia sobre la expresión de HLA-G en una línea celular de coriocarcinoma llamada JEG-3, cultivada con deferroxamina 200 μM (DFX, agente quelante de hierro). Para analizar el efecto de DFX, se determinaron los niveles de HIF-1 y -2, los cuales aumentaron durante los tiempos de incubación. Luego, se analizó la expresión de HLA-G y se observó que los niveles de ARNm y proteínas aumentaron gradualmente de manera dependiente del tiempo cuando se cultivaron las JEG-3 con DFX. Por lo tanto, se podría concluir que la expresión de HLA-G varía durante el cultivo en hipoxia, y como los niveles de HIFs y los de HLA-G aumentaron gradualmente a mayores tiempos de incubación, estos factores estarían actuando como moduladores positivos de la expresión de HLA-G.

HLA-G is a non-classical MHC class I molecule that modules negatively the local immune response. This protein has restricted tissue expression in physiological conditions. However, its expression can be induced in pathological conditions such as several neoplasias. The quick growth of tumor cells creates a hypoxic environment where low oxygen levels lead to the accumulation of hypoxia inducible factors (HIF), which modulate several pro-oncogenic vias. In this context, HIF could positively modulate the HLA-G expression in tumor cells to evade the immune system. The aim is to evaluate the effect of hypoxia on HLA-G expression in a choriocarcinoma cell line called JEG-3 when were cultured with deferrioxamine 200μM (DFX an iron chelator mimicking hypoxia). The effect of DFX was analyzed and showed that HIF-1 and -2 levels increased during incubation times. Then, HLA-G expression was analyzed. The mRNA and protein levels were increased gradually in a time-dependent manner when JEG-3 cells were cultured with DFX. We can conclude that HLA-G expression was affected during hypoxia culture. Therefore, as HIFs and HLA-G levels increased gradually at longer incubation times, it could be considered that these factors were one of the positive modulators of HLA-G expression.